透射及掃描電鏡的操作方法
更新時間：2016-07-11 點擊量：5251
一、實驗目的：
1、了解透射電鏡、掃描電鏡各部件的名稱、結構及性能;
2、了解透射及掃描電鏡的基本操作程序;
3、了解電鏡樣品制備的配套設備。
二、實驗儀器及用品：
透射電鏡;掃描電鏡;小白鼠肝臟超薄切片;酵母菌或乳酸桿菌的負染樣品;噴好金膜的葉片及花粉樣品
三、方法步驟：
(一)透射電鏡操作規程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規程，通過操作考試后才能正式上機操作。
2、操作程序
1)開機準備
(1) 合上總電源閘刀，開啟電子交流穩壓器，電壓指示應為220V。開啟循環水，溫度指示應為15-20℃。
(2) 開啟主機真空開關。
(3) 約20分鐘后，待高真空指示燈及照相室指示燈亮。
2)工作程序
(1)開啟主機電源開關，待熒光屏顯示操作數據后再進行下一步。
(2)逐級加高壓致所需電壓，每加一級高壓，必須等高壓表中指示針停止擺動才能加下一級。如指示針移出量程，必須從zui低移級加起。
(4) 根據說明書要求進行合軸操作，使儀器處于*操作狀態。
(4)根據說明書的操作要求進行觀察、換樣和拍照。
(5)作好實驗記錄及儀器使用記錄。
3)關機程序
(1)關燈絲電流。
(2)關高壓。
(3)關主機電源開關。
(4)關真空開關。
(5) 20分鐘后，關循環水和電子交流穩壓器開關。
(6) 關閉總電源。
(二)掃描電鏡操作規程：
1、本儀器的操作者必須熟悉儀器的全部操作規程，通過操作考試后才能正式上機操作。
2、操作程序
1)開機準備
(1)合上總電源閘刀，開啟電子交流穩壓器，電壓指示應為220V。開啟冷卻循環水裝置電源開關。
(2)開啟試樣室真空開關(VACUUM POWER)，開啟試樣室準備狀態開頭(STAND BY)。
(3)開啟控制柜電源開關(POWER).
(4)約20分鐘后，往試樣室液氮冷井中加入液氮。
2)工作程序
(1)開啟試樣室進氣閥控制開關(CHAMB VENT)，將試樣放入試樣室后將試樣室進氣閥控制開關(CHAMB VENT)關閉抽真空。
(2)開啟鏡筒真空隔閥。
(3)加高壓(ACCELERATION POTENTIAL)至25KV.
(4)加燈絲電流(FILAMENT)至7.5-8.
(5)調節顯示器對比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)至適當位置.
(6)將圖象選區開關撥至全屏(FULL).
(7)調節聚焦旋鈕(MEDIUM)和(FINE)至圖象清晰。
(8)選擇適當的掃描速率(SCAN RATE)觀察圖象。
(9)根據說明書的操作要求進行觀察和拍照。
(10)作好實驗記錄及儀器使用記錄。
3)關機程序
(1)關燈絲電流(FILAMENT)。
(2)關高壓(ACCELERATION POTENTIAL)。
(3)反時針調節顯示器對比度(CONTRAST)、亮度(BRIGHTNESS)到底.
(4)關閉鏡筒真空隔閥。
(5)關主機電源開關。
(6)關真空開關。
(7)20分鐘后，關循環水和電子交流穩壓器開關。
(8)關閉總電源。
四、觀察結果：
1、小白鼠肝臟超薄切片：一般可見細胞膜、核膜、內質網、線粒體、肌纖維等結構。
2、酵母菌或乳酸桿菌的負染樣品：由于重金屬鹽在樣品周圍的堆積而使樣品顯示負的反差，從而襯托出樣品的形態和大小。酵母菌近球型，有時可見出芽生殖;乳酸桿菌為桿狀。
3、葉片在掃描電鏡下一般可見上表皮有各種紋飾，下表皮可見氣孔器形態
4、花粉在掃描電鏡下一般可見表面的萌發溝和紋飾。
觀察過程中尋找典型部位進行拍照。
